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    1.將偏光顯微鏡的聚光器和接物鏡換成相差聚光器和相差物鏡，在光路上加綠色濾光片。

    2.聚光器轉(zhuǎn)盤刻度“0”調(diào)節(jié)光稱使視野亮度均勻。

    3.將釀酒酵母和大腸桿菌的培養(yǎng)物制備水浸片，于載物臺上，用低倍物鏡(10x)在明視野下調(diào)節(jié)亮度并聚焦樣品。

    相差偏光顯微鏡檢對載玻片、載玻片的要求很離。載玻片厚度應(yīng)在1.0 mm左右，若過厚，環(huán)狀光闌的亮環(huán)變大，過薄則亮環(huán)變小;載玻片厚薄不均，凸凹不平，或有劃痕、塵埃等也都會影晌圖像質(zhì)量。而蓋玻片的標(biāo)準(zhǔn)厚度通常為0.16-0.17mm，過薄或過厚都會使像差、色整增加，影響觀察效果。

    4.將聚光器轉(zhuǎn)盤刻度且“10”與所用10 x物鏡相匹配)。注意由明視野轉(zhuǎn)為環(huán)狀光闌時(shí)，因進(jìn)光暇減少，要把聚光器的光圈開足，以增加視野亮度。

    5.取下目鏡，換上合軸調(diào)節(jié)望遠(yuǎn)鏡。用左手指固定望遠(yuǎn)鏡外筒一邊觀察一邊用右手轉(zhuǎn)動其內(nèi)筒，使其升降，對焦使聚光器中的亮環(huán)和物鏡中的暗環(huán)清晰;當(dāng)雙環(huán)分離時(shí)，說明不合軸?？捎貌吖馄鞯恼{(diào)中螺旋移動亮環(huán)，直至雙環(huán)完全重合。

    6.按上法依次對其他放大倍數(shù)的物鏡和相應(yīng)的環(huán)狀光附進(jìn)行合軸調(diào)節(jié)。

    目鏡的合軸調(diào)節(jié)是取得良好觀察效果的關(guān)鍵。若環(huán)狀光闌的光環(huán)和相差物銳中的相位環(huán)不能精準(zhǔn)吻合會造成光路紊亂，應(yīng)被吸收的光不能吸收，該推遲相位的光波不能推遲，失去相差偏光顯微鏡的效果。

    7.取下望遠(yuǎn)鏡，換回目鏡，選用適當(dāng)放大倍數(shù)的物鏡進(jìn)行觀察。